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293T HCP ELISA檢測試劑盒

產品簡介

293T HCP ELISA檢測試劑盒采用雙抗夾心法檢測樣本中293T HCP含量,將293T抗體預包被在微孔板上,將標準品與待測樣本加入到已包被的反應孔內進行孵育。存在的293T蛋白會定量的與微孔板中的抗體結合,洗滌除去未結合物,加入生物i素標記的抗293T蛋白抗體,最后加入親和素標記HRP,形成抗體-抗原-生物i素抗體-酶標親和素復合物,通過TMB顯色程度指示樣品中蛋白含量。

產品型號:HG-HCP001
更新時間:2025-12-01
訪問量:576
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    293T HCP ELISA 檢測試劑盒說明書

    貨號:HG-HCP001

    293T HCP ELISA檢測試劑盒

    本試劑僅用于檢測樣本中293T HCP組分的含量。

    產品簡介:

    本品采用雙抗夾心法檢測樣本中293T HCP含量,將293T抗體預包被在微孔板上,將標準品與待測樣本加入到已包被的反應孔內進行孵育。存在的293T蛋白會定量的與微孔板中的抗體結合,洗滌除去未結合物,加入生物i素標記的抗293T蛋白抗體,最后加入親和素標記HRP,形成抗體-抗原-生物i素抗體-酶標親和素復合物,通過TMB顯色程度指示樣品中蛋白含量。使用前請仔細閱讀說明書并檢查試劑盒組分。
    檢測范圍: 37-27000 ng/mL
    定  量  限: 37ng/mL
    精  密  度: CV%≤10%, RE%≤±15%

    規格:

    96 T

    應用:

    本試劑盒采用雙抗夾心法定量分析以293T為表達細胞的生物藥中宿主蛋白雜質,可檢測293T宿主蛋白雜質所需要的全部組分。

    產品組成:

    組分規格配制
    293T HCP Coated Plate(包被酶標板)8孔×12條即用型
    Anti- 293T HCP -Biotin(檢測抗體 100×)150μL×1管1:99用稀釋緩沖液稀釋
    Streptavidin HRP( 酶結合物 10×) 375μL×3管1:9用稀釋緩沖液稀釋
    293T HCP Standard(標準品)600μL×1管(81ug/mL)按建議稀釋方式操作
    Diluent Buffer (稀釋液) 1g×1瓶用 1×PBS-T 現配現用(1g/100ml)
    10×PBS-T Wash Buffer (10×PBS-T洗液)50mL×1瓶1:9用去離子水稀釋
    TMB Substrate(顯色液)15mL×1瓶即用型
    Stop Solution(終止液)15mL×1瓶即用型
    封板膜 5張即用型
    說明書1份即用型

    產品儲存條件與有限期:

    2~8℃避光保存,有效期8個月。

    需要準備材料:

    ◆?酶標儀
    ◆ 去離子水
    ◆ 微孔板恒溫振蕩器
    ◆ 全新濾紙
    ◆ 微量加液器及吸頭
    ◆ 渦旋振蕩器

    試劑配制:

    1.平衡: 將所需試劑移到室溫(18~25℃)平衡30分鐘。
    2.配液:
    ?1×PBS-T 洗滌液:計算實驗所需工作液體積,取適量 10×PBS-T 洗液,用去離子水進行 10 倍稀釋,混勻后備用;
    ?稀釋液工作溶液:根據實驗需求取適量稀釋液干粉按(1g/100mL)的比例,用 1× PBS-T 溶解混勻,也可一次性稀釋后分裝,放置 -20 ℃保存。避免稀釋液反復凍融。
    ③檢測抗體工作液:計算實驗所需工作液體積,取適量生物i素抗體用稀釋液進行100倍稀釋,充分混勻備用;
    ④酶結合物工作液:計算實驗所需工作液體積,取適量酶結合物用稀釋液進行10倍稀釋,充分混勻備用;
    ⑤標準品及樣品使用稀釋液進行稀釋。
    3.標準品稀釋:

    管號標準液濃度
    (ng/mL)
    標準液體積
    (μL)
    稀釋液體積
    (μL)
    總體積
    (μL)
    終濃度
    (ng/mL)
    剩余體積
    (μL)
    8 81000 110 220 330 27000 220
    7 27000 110 220 330 9000 220
    6 9000 110 220 330 3000 220
    5 3000 110 220 330 1000 220
    4 1000 110 220 330 330 220
    3 330 110 220 330 110 220
    2 110 110 220 330 37 330
    1 //220 220 0 220

    實驗步驟:

    1.使用前,將所有試劑充分混勻,避免產生氣泡。
    2.根據實驗孔數量,確定所需的板條數目,剩余板條放回含干燥劑的鋁箔袋,密封。
    3.加樣: 每孔加入100μL標準品、樣品、陰性對照至相應孔中。用封板膜封板后在室溫(18~25℃)下反應1.5h。

    4.洗滌: 棄去各孔內液體,用1×PBS-T洗滌液注滿微孔(250μL/孔),靜置30秒后棄去孔內液體;重復3次,每一次洗板完成后在濾紙上拍干。
    5.加生物i素檢測抗體工作液: 每孔加生物i素檢測抗體工作液100μL,用封板膜封板后室溫(18~25℃)下反應45分鐘。
    6.洗滌: 棄去各孔內液體,用1×PBS-T洗滌液注滿微孔(250μL/孔),靜置30秒后棄去孔內液體;重復3次,每一次洗板完成后在面巾紙上拍干。
    7.加酶結合物工作液: 每孔加酶結合物工作液100μL,用封板膜封板后室溫(18~25℃)下反應30分鐘。
    8.洗滌: 棄去各孔內液體,用1×PBS-T洗滌液注滿微孔(250μL/孔),靜置2 min后棄去孔內液體;重復3次,每一次洗板完成后在面巾紙上拍干。
    9.顯色: 每孔分別加底物顯色液100μL,輕微振蕩混勻后用封板膜封板置25℃避光顯色15分鐘。
    10.測定: 每孔加終止液100μL,輕微混勻。選擇酶標儀主波長450nm,測定各孔吸光值(OD值)。

    結果分析:

    本產品建議采用四參數的擬合方式進行線性擬合及計算。

    標準曲線OD處理(見下例,僅為示例,具體以實際測定為準):

    標準品濃度(ng/mL)O D 值 ( 1 )O D 值 ( 2 )平均值
    27000 2.507 2.494 2.501
    9000 1.73 1.733 1.732
    3000 1.126 1.111 0.119
    1000 0.773 0.77 0.772
    330 0.496 0.475 0.486
    110 0.289 0.285 0.287
    37 0.205 0.195 0.200
    0 0.140 0.137 0.139
    以標準品理論濃度與對應OD值進行四參數擬合,得到標準曲線(如下圖所示)


    注意事項

    1. 試劑應按標簽說明儲存,使用前室溫(18-25℃)平衡。
    2. 預包被板條使用前,請平衡至室溫再打開外包裝袋,實驗中不用的板條應立即放回包裝中密閉封口, 4℃可保存一個月。其余不用試劑應包裝好或蓋好。
    3. 標準品、生物i素及酶結合物體積量很小,使用前請短暫離心,以使管壁或管蓋的液體沉積到管底。
    4. 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
    5. 使用前檢查試劑盒內各種試劑。試劑稀釋、加樣和終止反應應充分混勻或搖勻對實驗結果尤為重要。
    6. 洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在潔凈的紙巾上充分拍干,直至看不到水印。勿將紙巾直接放入反應孔中吸水。
    7. 底物顯色液對光敏感,避免長時間暴露于光下,避免與金屬接觸影響結果。
    8. 本產品為一次性使用的試劑盒,請在效期內使用。


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柏萊源(天津)生物科技有限公司的優勢:

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效期保障:嚴格把控產品質量,確保試劑效期新鮮,保障實驗結果的可靠性。

專業技術支持:提供詳細的實驗方案和技術指導,幫助用戶優化實驗條件,提高實驗成功率。

定制化服務:根據用戶需求,提供個性化的產品和服務解決方案。

售后保障:完善的售后服務體系,及時解決用戶在使用過程中遇到的問題。

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